黑色素瘤相關(guān)抗原C3抗體免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟

黑色素瘤相關(guān)抗原C3抗體免疫熒光技術(shù)的實(shí)驗(yàn)步驟：

一、準(zhǔn)備好試劑與儀器：

磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。

二、實(shí)驗(yàn)步驟

1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上，十分鐘后棄去，使標(biāo)本保持一定濕度。

2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液，使其覆蓋標(biāo)本，置于有蓋搪瓷盒內(nèi)，保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。

3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS沖洗后，再按順序過0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分鐘，并不停地?fù)u晃振蕩。

4.取出玻片，用濾紙吸去多余水分，但不使標(biāo)本干燥，加一滴緩沖甘油，以蓋玻片覆蓋。

5.立即用熒光顯微鏡觀察。觀察標(biāo)本的特異性熒光強(qiáng)度。

核酸電泳液：50×TAE電泳液（250 mL)
堿性膠電泳液
天恩澤超級(jí)電泳液
天恩澤超級(jí)電泳液（含染料）（見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品）
核酸上樣液
DNA非變性PAGE上樣液（1.5 mL）
DNA非變性PAGE上樣液（10 mL）
DNA堿性膠上樣液（1.5 mL）
DNA堿性膠上樣液（10 mL)
DNA尿素-PAGE上樣液（1.5 mL）
DNA尿素-PAGE上樣液（10 mL）
DNA上樣液（紅），6×（非甘油）（見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品）
DNA上樣液（藍(lán)），6×（非甘油）（見關(guān)聯(lián)產(chǎn)品）
DNA上樣液，6×（紅）
DNA上樣液，6×（藍(lán)）
miRNA尿素-PAGE上樣液（1.5 mL）
miRNA尿素-PAGE上樣液（10 mL）
三合一RNA上樣液（A型）
三合一RNA上樣液（B型）
核酸染料
SYBR Green Ⅱ核酸染料